An inexpensive antigen for serodiagnosis of Chagas’ Disease

In this prospective study we evaluated the performance characteristics of a specific and sensitive antigen preparation (AgA) used in an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of anti-Trypanosoma cruzi antibodies in serum samples, for Chagas’ disease diagnosis. The antigen production was achieved by combination of nutritional stress and autoclaving the parasites. Specificity and sensitivity were evaluated in two separate tests, using 152 sera from healthy individuals and 175 sera from Chagas’ patients (70 by xenodiagnosis). Cross-reactivity was tested using 289 sera from patients who had a parasitological diagnosis of a disease known to induce antigenic responses towards T. cruzi. All of these sera were tested with our AgA-ELISA and with 3 commercial diagnosis kits. To evaluate the agreement of results between our AgA-ELISA and a “gold standard” test for Chagas, we tested 566 sera from an endemic area. Results: sensitivity and specificity were 100 percent; cross-reactivity was the lowest compared with commercial kits. Overall agreement with the gold standard test was excellent (kappa=0.92). AgA-ELISA exhibits levels of sensitivity, specificity and cross-reactivity comparable or superior to those shown, obtained with the commercial kits used in our country, while being at least 10 times less expensive. This balance between diagnostic accuracy and cost makes AgA-ELISA useful for blood bank screening in poor regions of the world suffering from Chagas’ disease. Further validations of this antigenic formulation in other countries are necessary.

Este estudio fue realizado para evaluar las características de sensibilidad y especificidad de una formulación antigénica (AgA), producida a bajo costo, para detectar anticuerpos dirigidos a Trypanosoma cruzi, en muestras de suero de pacientes con enfermedad de Chagas. El AgA fue producido por el efecto combinado de estrés nutricional y autoclave de los parásitos. La especificidad y sensibilidad fueron evaluadas en dos estudios separados, con 152 sueros de individuos sanos y 175 de pacientes Chagásicos. La reactividad cruzada con 289 sueros de pacientes con diagnóstico parasitológico de enfermedades con anticuerpos que reaccionan con antígenos de T. cruzi. Estos sueros fueron evaluados con AgA-ELISA y con tres estuches comerciales. 566 muestras de suero provenientes de un área endémica, fueron empleadas para estudiar la concordancia entre nuestro diagnostico y una prueba designada por nosotros como patrón oro estándar. Resultados: la sensibilidad y especificidad fue de 100 por ciento. El AgA presento el más bajo porcentaje de reactividad cruzada, respecto a los estuches comerciales evaluados. La concordancia con la prueba patrón oro, en Venezuela, fue excelente (kappa=0,92). En conclusión, Aga-ELISA, presentó niveles de sensibilidad, especificidad y de reactividad cruzada, comparables o superiores a los obtenidos por los tres estuches comerciales mas empleados en el país, pero con costos de producción al menos 10 veces menor. Este balance conveniente, favorece su potencial uso para el despiste en los bancos de sangre de los países pobres y endémicos para la enfermedad de Chagas. Futuras validaciones de esta formulación en otros países es necesaria.

Serological diagnosis of Chagas disease: evaluation and characterisation of a low cost antigen with high sensitivity and specificity

In spite of evident progress in the serology of Chagas disease, the requirement for new diagnostic antigens persists. We have evaluated different antigens obtained from Trypanosoma cruzi grown in medium rich in nutrients or under nutrient stress, autoclaved or sonicated and fractionated by differential centrifugation. The resulting antigens were evaluated for diagnosis of Chagas disease using ELISA. Immunofluorescence of the parasites demonstrated that nutrient stress induced changes in the distribution and density of antigens recognised by a pool of sera from experimentally infected mice. When evaluated using ELISA, it was evident that most fractions had good sensitivity but poor specificity. Surprisingly, the best specificity and sensitivity was observed with parasites cultured under nutrient stress and autoclaved. Furthermore this antigen had low cross reactivity with sera from other parasitic diseases, Leishmaniasis in particular. Western blot analysis demonstrated that autoclaving seems to non-specifically eliminate cross-reactive antigens. In conclusion, autoclaving epimastigotes of T. cruzi, after nutrient stress, allowed us to obtain an antigen that could be used in the serological diagnosis of Chagas disease.

Proliferation and bystander suppression induced by membrane and flagellar antigens of Trypanosoma cruzi

We have studied, in vitro, proliferation induced by flagella (FE) and membrane (ME) antigenic fractions of T. cruzi epimastigotes, as well as their regulatory effect on the proliferative response to PPD (Protein Purified Derivative). Crude flagella as well as bands from Western blots of flagella and membrane of epimastigotes were tested. Crude flagella elicited higher proliferation in mononuclear cells from patients with Chagasic cardiomyopathy (CDM) than in patients with no evidence of cardiac pathology (INF). Fractionated antigens induced a lower proliferative response, in intensity as well as in frequency, than the crude extracts. With FE, bands between 150 and 24.3 kDa (B3 to B18 with the exception of B4 and B13) induced higher CPM (Counts Per Minute) in CDM. In INF only bands B7 (87.3 to 80.1 kDa), 9 (69.8 to 64.6 kDa) and 13 (45.4 to 41.5 kDa) had high CPM. ME bands also elicited higher proliferation in CDM. However, only 5 out of 14 bands gave CPM higher than 1000 in CDM and none in INF. The mean down regulation (DR) of most bands was similar in both groups. But the frequency of relevant DR elicited by FE was significantly higher in CDM. In contrast the frequency of up regulation (UR) was higher in INF. Bands 13 and 14 of ME did not induce DR in most INF. The discordance between the frequency of relevant DR in CDM and INF was more evident with ME than with FE. The frequency of (UR) was 50% or higher with all ME bands in INF, but, lower than 12% in CDM. The higher UR in INF and of DR in CDM, suggest the presence of some balance or interaction in INF that is lost in CDM. In ME there might be antigens that could be relevant for the immunoprofilaxis of Chagas' disease. The difference in the clinical status of the two groups seems to be associated with the recognition of different groups of antigens together with variations in the nature of the regulation of the response of mononuclear cells to these antigens.

Hemos estudiado, in vitro, la respuesta proliferativa de células mononucleares a antígenos de Flagelo (FE) y Membrana (ME) de epimastigotes de T. cruzi, así como su efecto regulador en la respuesta proliferativa a PPD (Protein Purified derivative). Fue evaluada tanto la respuesta a Flagelo crudo como a las bandas de Western blots de FE y ME. El flagelo crudo indujo una proliferación de las células mononucleares más intensa en los pacientes con cardiomiopatía (CDM) que en los pacientes sin evidencia de patología cardiaca (INF). Los antígenos fraccionados causaron una menor respuesta proliferativa, tanto en intensidad como en frecuencia, que los antígenos crudos. Las bandas de FE, entre 150 y 24,3 kDa (B3 a B18 con la excepción de B4 y B13), indujeron CPM mas altas en CDM. En INF solo las bandas B7 (87,3 a 80,1 kDa), 9 (69,8 a 64,6 kDa) y 13 (45,4 a 41,5 kDa) causaron CPM (Cuentas Por Minuto) altas. Las bandas de ME también indujeron una proliferación mayor en CDM. Sin embargo, solo 5 de 14 bandas tuvieron CPM promedio mayores de 1000 en INF. La mayor parte de las bandas causaron una baja regulación (BR) que fue similar en ambos grupos. Sin embargo, la frecuencia de BR relevante producida por FE fue significativamente mayor en CDM. Por el contrario la sobre regulación (SB) fue mayor en INF. Las bandas 13 y 14 de ME no indujeron BR en la mayor parte de los INF. La discordancia entre la frecuencia de BR relevante en CDM e INF fue mas evidente con ME que con FE. La frecuencia de SB fue 50% o mas con todas las bandas de ME en INF, pero menor que 12% en los CDM. El predominio de SB en INF y de BR en CDM sugiere la presencia, en los INF, de algún tipo de equilibrio o interacción que esta ausente en los CDM. En ME pudieran estar presente antígenos relevantes para la inmunoprofilaxis de la enfermedad de Chagas. En conjunto nuestros resultados sugieren que las diferencias en los cuadros clínicos pudieran tener relación con la respuesta observada a los diferentes...

Proliferation and bystander suppression induced by antigens of Trypanosoma cruzi: evaluation with a modification of the T cell blot technique

Se estudió tanto la respuesta proliferativa inducida por antígenos solubles de epimastigotes y tripomastigotes de T. cruzi, como su efecto regulador en la respuesta proliferativa a PPD. Se evaluaron tanto los extractos crudos del parásito como las bandas de “Western blots” de antígenos solubles de epimastigotes y tripomastigotes. La proliferación de las células mononucleares, en respuesta a los extractos crudos, fue mas intensa en los pacientes con cardiomiopatía chagásica (CDM) que en los pacientes sin evidencia de patología cardiaca (INF). La respuesta a los antígenos fraccionados fue menor, en frecuencia e intensidad, a la observada con los antígenos crudos. Las bandas de bajo peso molecular (17 a 30 kDa) de los antígenos solubles de epimastigotes dieron una respuesta mas alta en pacientes CDM y las de peso molecular intermedio (31 a 62 kDa). Este patrón se invirtió con las bandas de antígenos solubles de tripomastigotes. Ambos extractos solubles indujeron sobre regulación o baja regulación de la respuesta a PPD en un número variable de pacientes en ambos grupos. Con los antígenos semi purificados la intensidad de la baja regulación fue mas intensa en pacientes sin evidencia de enfermedad cardiaca, sin embargo la frecuencia fue mayor en los pacientes con cardiomiopatía chagásica (CDM). Seis bandas del Western blot de antígenos solubles de tripomastigotes (B1, 4-7, y 9) se asociaron con una baja regulación en 100 por ciento de los pacientes CDM. La sobre regulación observada con la mayoría de las bandas de la fracciones crudas fue significativamente mas alta, y mas frecuente en pacientes con patología cardíaca. La mayoría de las bandas de antígeno soluble de tripomastigotes (10/15; 66,6 por ciento) no indujeron sobre regulación en pacientes con cardiomiopatía. Estos datos sugieren que la diferencia en la clínica de los dos grupos pueden deberse a que los pacientes de cada grupo reconocen diferentes antígenos conjuntamente con variaciones en la regulación as...

Etiopatología de la enfermedad de chagas: una nueva perspectiva / Disease of chagas etiopathology: a new perspectives

La enfermedad de chagas representa un importante problema de salud pública en la mayor parte de los países de Latinoamérica. Sin embargo, a pesar de su evidente importancia, aun no tenemos una teoría que permita explicar la o las causas de la patología cardíaca que caracteriza esta enfermedad. Una hipótesis que ha recibido una aceptación importante ha sido la que postula que la miocardiopatía chagásica es la consecuencia de una patología autoinmunitaria. Sin embargo, evidencias recientemente reportadas han puesto en duda la relevancia de esta hipótesis. En este artículo presentamos la hipótesis de que la aparición del daño cardíaco depende del balance que se establece entre los mecanismos inmunitarios que controlan el parásito y los mecanismos inmunitarios que inducen patología. Un aspecto central de esta hipótesis es que este equilibrio genera un continuo similar a una variable analógica. Por lo cual debería ser posible modificar el recurso de la enfermedad si se puede cambiar el equilibrio entre las variables. De esta hipótesis se derivan una serie de corolarios que son confirmados por resultados experimentales de nuestro laboratorio y de otros investigadores

Defective production of interleukin 2 in patients with Chaga's Disease. Purified IL-2 augments in vitro response in patients with chagasic cardiomyopathy

The production of interleukin 2 (IL-2) by peripheral blood mononuclear cells, from patients with different clinical forms of Chagas' disease and healthy controls, was evaluated after stimulation with Trypanosoma cruzi antigen, PPD and PHA. PHA induced higher production of IL-2 in infected patients than healthy controls. No diferences were found between infected groups. With PPD the trend was similar, the only difference was that asymptomatic infected patients (INF) showed higher levels of IL-2 production than patients with cardiomyopathy (CDM). With T. cruzi antigen, most patients showed little or no IL-2 production at 24 hr, a peak at 48 hr and an abrupt fall at 72hr. A similar pattern of IL-2 production was observed in INF and CDM. To evaluate the physiologic relevance of the deficit in IL-2 production, we studied the effect of non-mitogenic concentratios of IL-2 in the proliferative response to specific antigens. The addition of IL-2 only enhanced the proliferative response of CDM patients. These observations suggest that patients suffering Chagas' disease, particularly CDM, have a significant reduction in the capacity to produce IL-2. These findings could be of importance in the pathogenesis of Chagas' disease.

Cell mediated immune response in patients with Chagas. Correlation with the presence of Chagasic cardiomyopathy

We are reporting data from a series of studies undertaken to evaluate if there was any correlation between the cell mediated immune response and the presence of Chagasic cardiomyopathy. Infected patients without evidence of heart pathology (INF), infected patients with Chagasic cardiomyopathy (CDM) and healthy controls, were studied. We evaluated: a) the correlation of the immune response with the presence of parasitemia; b) the suppression induced by Trypanosoma cruzi antigens using a costimulation assay; c) their production of IL2 when stimulated with antigens and mitogen; and d) the response of variable proportion of T cells subpopulations to parasite antigens. The immune response of INF was lower when parasitemia could be demonstrated. The negative regulation of the cell mediated immune response was higher in INF. The production of IL2 was lower in patients than in controls. CDM patients showed a tendency to produce less IL2 than INF. The outline of the response of variable proportions of subsets of T cells had a high concordance in CDM and no concordance in INF. These results show that there are differences in the cell mediated immune response of INF and CDM. The high concordance of the response of variable proportions of T cells, from CDM, suggests that this test could have a prognostic value

Trypanosoma cruzi: infectivity and virulence of trypomastigotes incubated with leukocytes and serum from patients with chagas disease / Tripanosoma cruzi: infectividad y virulencia de tripomastigotes incubados con leucocitos y suero de pacientes con enfermedad de chagas

An important issue for the understanding of the host-parasite relationship in Chagas' disease is the extent of the action of the immune system on the parasite. To advance our understanding of this aspect, we evaluated the effect of leukocytes and/or sera from patients with Chagas' disease on trypomastigotes of Trypanosoma cruzi. We incubated, in vitro, leukocytes and sera, from patients with Chagas disease without evidence of heart disease (INF), patients with Chagasic cardiopathy (CDM) and healthy controls (VOL), with trypomastigotes at 37-C for three hours. Mice were inoculated with parasites at the incubation. We kept a record of the survival time of each animal and every three days we evaluated their Parasitemia. INF (36.4%) and CDM (42.9%) prolonged the prepatent period, but not Vol. Only CDM (57.1%) extended the survival time. The sera from CDM patients that extended the survival if mice prolonged the prepatent period. However serum alone did not extend the survival time, providing evidence that leukocytes are required to decrease the virulence of the inoculum. The capacity of leukocytes and sera, from CDM, to prolong survival time shows that the immune system of patients with Chagasic cardiomyopathy can effect the parasite more intensely than IFN. On the other hand, the higher frecuency xenodiagnosis in CDM (11), suggests that, in vivo, occur a down regulation of the immune response

Cell mediated immunity in Chagas' disease. Trypanosoma cruzi antigens induce suppression of the in vitro proliferative response of mononuclear cells

The partial suppression of the cell-mediated immune response by Trypanosoma cruzi antigens in patients with Chagas' disease is demonstrated in a costimulation assay with T. cruzi antigens and Mycobacterium tuberculosis purified protein derivative (PPD) or Tetanus toxoid (TT). ononuclear cells from 13 patients with chagasic infection without evidence of heart disease, 10 patients with chagasic cardiomyopathy and 7 healthy blood donors were stimulated with antigen A (autoclaved epimastigotes), PPD, TT, PPD + A, PPD + TT and TT + A. The average percentage of suppression induced by costimulation of mononuclear cells with PPD and antigen A was 47.1% in patients with chagasic infection without heart disease (INF), 38.8% in patients with chagasic cardiomyopathy (CDM) and 23.3% in healthy controls. Similar values were observed when living trypomastigotes were used. A costimulatory study with PPD and TT, PPD and A and TT and A was carried out in 8 patients with chagasic infection, in order to evaluate the possibility that this difference could be due to a nonspecific inhibitory effect. The mean suppression induced by TT + PPD was -8.9, with TT + A was 52.7 and with PPD + A was 50.1. The data reported show that T. cruzi antigens induce a specific suppression of the proliferative responseof mononuclear cells, that might be relevant to the persistence of the parasite in the host

Evaluación in vitro de la producción de interleukina 2 por linfocitos de pacientes con enfermedad de chagas / Evaluation in vitro of the interleukin 2 production from lymphocytes of patients with chagas disease

La interlucina 2 (IL2) es una linfoquina clave para la proliferación de los linfocitos tanto frente a antígenos específicos, como frente a activadores policlonales. En este trabajo fueron estudiados 12 pacientes con infección chagásica, sin evidencia de cardiopatía, se obtuvieron linfocitos de sangre periférica y se incubaron en placas de 96 pozos en presencia de epimastigotes. Los promedios de las unidades producidas por linfocitos INF frente a PHA son más altos que los obtenidos en los CDM. Se concluye demostrando que linfocitos de INF producen más niveles de IL 2 cuando son estimulados por PHA

studio in vitro e in situ de la respuesta inmune en el eritema discrómico perstans y vitiligo / Study in vitro e in situ of the immune responsein the Erythema dyschromicum perstans and vitiligo

El eritema discrómico perstans (EDP) y el vitiligo son dermatosis pigmentarias cutáneas de etiología desconocida, en las que existen evidencias que sugieren una importante participación del sistema inmune. En el presente trabajo, se estudiaron los infiltrados leucocitarios de ambas enfermedades. La caracterización linfocitaria in situ se realizó en pacientes con EDP mas clofazima y piel de voluntarios sin lesiones cutáneas aparentes. Los resultados obtenidos muestran que la administración de la droga estimula la acumulación de linfocitos T cooperador de las zonas afectadas de la piel

Evaluación de la actividad tripanicida in vitro de tres agentes antimicóticos sobre plasmas frescos infectados con T. Cruzi / Evaluation of the tripanicidad activity in vitro of 3 antimycotical agentes on fresh plasma infected with T. Cruzi

Siendo la incidencia de Chagas aún elevada en nuestros donantes de sangre y debido a que con frecuencia existe escasez de plasma y crioprecipitado para el tratamiento de los pacientes hemofílicos, se diseñó el siguiente trabajo con el fin de determinar si era posible usar estos hemoderivados infectados y debidamente pre-tratados profilácticamente, sin ningún riesgo para el receptor. Para este estudio se tomó plasma fresco Chagas negativo, el cual se inoculó con concentraciones conocidaas de Tripanosoma cruzi (Tc) y se incubó con los siguientes antimicóticos: Anfotericina B, Candicidina y Miconazol. El efecto de las drogas sobre el parásito se evaluó en placas de microtítulo de fondo plano, en las cuales se incubaron: 1.10 6 Tc/pozo con diluciones seriadas de los antimicóticos (Anfotericina B de 10 a 0,07 *g/ml, Candicidina de 0,6 a 0,01 *g/ml y Miconazol de 5.10-5 a 1.10-6 *g/ml). Se determinó la concentración que producía la muerte de los parásitos, puesta en evidencia por la pérdida de su movilidad, observada en el microscopio invertido cada 30 minutos, durante 3 horas. Para definir más precisamente la viabilidad de los parásitos se incubaron 2.10 5 y 2.10 6 Tc/ml de plasma con Anfotericina B a razón de 1 *g/ml, Candicidina a 1,2 *g/ml y Miconazol a 1.10 4 *g/ml por 3 horas a 4-C y luego se incubaron en cámaras de microcultivo de células por quintuplicado. Después de 14 días a 37-C se procesaron las cámaras y se determinó por observación microscópica la presencia de células infectadas. En base a este estudio se concluyó que la Anfotericina B tiene mayor capacidad tripanicida sobre el plasma...

Autoantibodies and inmunocomplexes in Chagas' disease / Autoanticuerpos e inmunocomplejos en la enfermedad de Chagas

The presence of an autoimmune process mediated by antibodies in Chagas'disease was evaluated by studying EVI antibodies, immune complexes (Clq binding) and anti-DNA antibodies in serum samples from patients with Chagasic infection (Group I), Chagasic infection and Chagasic cardiomyopathy (Group II) and normal Venezuelan blood back donors (Group III). The study was performed on both single serum samples and those obtained longitudinally. With simgle samples the incidence of positivity for EVI antibodies was higher in Group II patients (87.5%) than in Group I (66.6%). However, with the serum samples from a longitudinal study the incidence of patients with persistently positive EVI antibodies was the same in both groups (43%). No relationship coul be established between the incidence of EVI antibodies and eiter the clinical status or the detection of circulating parasites by xenodiagnosis. The immunoglobulin fraction carryng the EVI antibodies was identified as IgG.Higher values of circulating immune comlexes were found in serum samples from patients with Chagasic cardiomyopathy. However no patient from the longitudinal study showed a persistently high Clq binding activity. The levels of anti-DNA antibodies were not different between the groups studied. It was concluded that no evidence was found to link the presence of EVI or other auto-reactive antibodies with heart damage in Chagas'disease

Propuesta de una clasificación pronóstica en vitiligo / Propose of a prognosis classification in vitiligo

El principal interrogante al evaluar un paciente con vitiligo, es la posibilidad de repigmentación que éste pueda tener. En el presente trabajo intentamos usar algunos factores pronósticos que puedan ayudar en la caracterización de subgrupos de pacientes con vitiligo. Los parámetros considerados como factores pronósticos fueron: edad, localización, superficie corporal comprometida, enfermedades asociadas, familiares con vitiligo, presencia de repigmentación con o sin tratamiento, tiempo de evolución. Esta propuesta de clasificación permitirá escoger un diferente tratamiento, tomando en cuenta el potencial del mismo en función de las posibilidades de respuesta del mismo; y además permitiría realizar ensayos terapéuticos más confiables y reproducibles al homogeneizar los pacientes estudiados, haciendo a su vez los datos obtenidos más confiables

Estudio doble ciego comparativo entre melagenina y placebo en el tratamiento del vitiligo / Comparative double-blind study between melagenina and placebo in the vitiligo therapy

Se realizó un estudio a doble ciego comparativo y aleatorio para evaluar la efectividad terapéutica del extracto placentario humano EP-50 Melagenina R, en el tratamiento del vitiligo. El estudio incluyó a 24 pacientes de ambos sexos, de diferentes grupos etarios y cuadros clínicos variables de acuerdo con la extensión de las lesiones y tiempo de evolución de la enfermedad. La duración del estudio fue de 6 meses. A todos los pacientes se les practicó, además de la evaluación clínica, un estudio de las subpoblaciones linfocitarias en sangre periférica y una evaluación de la respuesta linfoproliferativa frente a la fitohemaglutinina (PHA) y Concavalina A, al iniciar y finalizar el estudio. La evaluación clínica e inmunológica no arrojó diferencias significativas entre el grupo que recibió Melagenina R y el grupo que recibió placebo. De los 24 pacientes evaluados, se encontró una mejoría leve en 9 pacientes del grupo tratado con Melagenina (75%) y en 6 pacientes del grupo placebo (50%). Estas diferencias no fueron estadísticamente significativas

Experiencia clínica con el uso de Clofazimina en el tratamiento de vitiligo: evaluación de la inmunidad celular / Clinical experience using Clofazimine in vitiligo therapy: evaluation of cellular immunity

Se reporta el ensayo clínico usando Clofazimina en 26 pacientes con vitiligo de la consulta de Dermatología del Instituto de Biomedicina en quienes fue realizada evaluación de la inmunidad celular antes y durante la administración de dicho fármaco

Estudio de la inmunidad celular in situ en eritema discrómico perstans y vitiligo / Study in situ of the cellular immunity in erythema dyschromicum perstans and vitiligo

El Eritema Discrómico Perstans (EDP) y el Vitiligo son dos dermatosis pigmentarias cutáneas de etiología desconocida. En el presente estudio los infiltrados leucocitarios de EDP (n=10) y de Vitiligo (n=5) fueron estudiados, usando la técnica de la inmunoperoxidasa de avidinabiotina (ABC) y anticuerpos monoclonales que reconocen las siguientes subpoblaciones celulares: T-Supresor-Citotóxico (CD8=Leu-2), T-cooperadores (CD4=OKT4), T-Supresores (Leu-15), Pan T (Leu-4), Macrófagos (Leu-M3) y células de Langerhans (CD1=Leu-6); y marcadores celulares para antígeno la, Gamma Interferón, Interleucina-2 y receptor para Interleucina-2. El análisis inmunocitoquímico mostró una acumulación selectiva de células T-Citotóxicas Leu-4+, Leu-2+, Leu-15-en la epidermis tanto de EDP como de lesiones recientes de Vitiligo. Además, un aumento en el número de células de Langerhans epidérmicas Leu-6 se observó en algunos de los casos de EDP y de Vitiligo. La relación CD4/CD8 en las lesiones y en la piel no envuelta para ambos desórdenes no mostró diferencias significativas, no obstante valores menores que uno se apreciaron sólo en los infiltrados de piel lesionada. Los macrófagos en los infiltrados dérmicos de EDP se encontraban generalmente yuxtapuestos al pigmento melánico. Los linfocitos que expresaban en su superficie antígenos tipo TAC, IL-2 y Gamma Interferón, fueron muy pocas en los infiltrados dérmicos. Algunas células NK se encontraban también presentes en la epidermis enferma. Estas observaciones morfológicas sugieren una importante participación de la inmunidad celular en la discromia de diversos desórdenes pigmentarios cutáneos

Characterization of the cellular immune response in chagas'disease patients / Caracterización de la respuesta inmunológica celular en pacientes con la enfermedad de chagas

The in vitro lymphocyte proliferative responses and some mechanisms possibly involved in immunoregulation, were evaluated in 57 patients with Chagas'disease. The patients were classified as being cardiomyophathic (CDM), with positive complement fixation tests (CFT) for T. cruzi, or as infected chagasic patients (INF) with a positive CFT but without any clinical evidence of cardiac involvement. The in vitro responses to T. cruzi antigens were significantly greater in both groups of patients than in the controls, the intensity of the reactions being greatest in CDM patients. Trypanosoma cruzi antigen-induced suppression of in vitro mitogen responsiveness was not detected in either group of Chagas'patients. The mitogenic responses to PHA of CDM patients were,in fact,significantly lower than those of healthly controls. Con A responses were normal in these patients,as was also the case in INF patients for both mitogens. Cell mixingexperiments, showed an augmentation in responsiveness to PHA by co-cultures of mononuclear cells from CDM patients with those from healthtly controls. This was not observed in combinations of cells from controls and INF patients. Due to thepossible modulatory influences of circulating immune complexes,these were also evaluated,higher levels being found in INF and CDM patients than in controls. Thesignificance of these results in the physiopathology of Chagas'is discussed